凍干外泌體促進(jìn)血管生成
血管生成為修復(fù)組織提供氧氣并提供營養(yǎng)。血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖是其重要組成部分。此外,它還需要與血管生成、內(nèi)皮細(xì)胞和周圍的細(xì)胞外基質(zhì)環(huán)境相互作用。
創(chuàng)面對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞具有趨化作用,使內(nèi)皮細(xì)胞穿透血管基底膜,進(jìn)入細(xì)胞外基質(zhì),形成管腔樣結(jié)構(gòu)并不斷延伸、分支,最終生成新的血管網(wǎng)。在此過程中,人間充質(zhì)干細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞來源的外泌體可增加創(chuàng)面新生血管的密度,這與促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移有關(guān)。
外泌體在凍干機(jī)需要選擇的保護(hù)劑,糖類保護(hù)劑有海藻糖(4% - 50mM)、山梨糖醇(10%)、蔗糖、甘露醇等;氨基酸包括谷氨酸、精氨酸、甘氨酸等(0.01M - 0.5M);血清成分如1%胎牛血清(FBS)可有效避免冷凍休克;脂質(zhì)體方面,部分提出在復(fù)蘇液中添加脂質(zhì)體(1% - 20%),用于破損囊泡膜的修復(fù)。
復(fù)合保護(hù)劑配方比單一保護(hù)劑更有效,如甘露醇+山梨醇(1% - 10% + 3% - 15%);海藻糖與外泌體膜脂雙分子層結(jié)合,防止低溫導(dǎo)致的脂質(zhì)重排和囊泡聚集;添加維生素B等成分可進(jìn)一步提升外泌體在常溫下的穩(wěn)定性;保護(hù)劑濃度需根據(jù)外泌體來源和特性進(jìn)行調(diào)整,如間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體凍干保護(hù)劑配方為1% - 6%甘露醇與3% - 15%山梨醇組合。
提供外泌體凍干工藝摸索,外泌體凍干工藝開發(fā),外泌體凍干放大生產(chǎn)等。